Effect of pasteurization on the antioxidant and oxidant properties of human milk / Efeito da pasteurização nas propriedades antioxidantes e oxidantes do leite humano

ABSTRACT Objective: To evaluate the effect of pasteurization on antioxidant and oxidant properties of human milk. Methods: 42 samples of milk before and after pasteurisation were used to evaluate the antioxidant activity by the ferric reducing capacity and by scavenging the 2,2'-azino-bis 3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid radical. Lipid peroxidation was estimated by the concentration of malondialdehyde product using the thiobarbituric acid reactive substances assay and by the evaluation of advanced oxidation protein products. Results: No significant difference was observed in fresh human milk and after pasteurization in relation to antioxidant properties determined by the ferric reducing capacity (50.0±3.4% and 48.8±3.0%, respectively) and by scavenging the 2,2'-azino-bis 3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid radical (28.9±1.5% and 31.2±1.3%, respectively). The results of malondialdehyde (62.6±4.1 and 64.3±3.6 µM/mg) and protein oxidation products (59.4±3.4 and 54.2±3.8 µM/L) of fresh and pasteurized milk, respectively, did not exhibited any significant difference. Conclusions: This data showed that human milk has an important antioxidant activity and that the pasteurizing process does not influence the antioxidant capacity, avoiding the peroxidation of breast milk lipids and the formation of advanced protein oxidation products.

RESUMO Objetivo: Avaliar o efeito da pasteurização nas propriedades antioxidantes e oxidantes do leite humano. Métodos: Foram utilizadas 42 amostras de leite cru e após a pasteurização, para avaliação da atividade antioxidante pelos métodos da capacidade redutora do ferro e sequestro dos radicais derivados do ácido 2,2'-azino-bis (3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico). A peroxidação lipídica (PL) foi estimada pela determinação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico e pela avaliação dos produtos proteicos de oxidação avançada. Resultados: Não se observou diferença significante no leite humano cru nem após a pasteurização em relação às propriedades antioxidantes determinadas pelo método da redução do ferro (50,0±3,4% e 48,8±3,0%, respectivamente) e pelo sequestro dos radicais derivados do ácido 2,2'-azino-bis (3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico) (28,9±1,5% e 31,2±1,3%, respectivamente). Os resultados médios de malondialdeído [MDA] (62,6±4,1 e 64,3±3,6 µM/mg) e produtos de oxidação proteica (59,4±3,4 e 54,2±3,8 µM/L) entre os grupos leite fresco e leite pasteurizado, respectivamente, não evidenciaram diferença significante. Conclusões: Os dados demonstraram que o leite humano possui importante atividade antioxidante e que o processo de pasteurização não interfere nessa propriedade, evitando assim a peroxidação dos lipídios e a formação de produtos avançados de oxidação proteica.

In vitro cytotoxic activity of five commercial samples of Tribulus terrestris Linn in Espírito Santo (Brazil)

ABSTRACT The objective was to investigate the total saponin and protodioscin concentrations and the cytotoxicity in vitro, of five samples of the plant Tribulus terrestris, commercially available in the metropolitan region of Vitória - Espirito Santo, Brazil, and to compare them with the aqueous extract of the plant. The chromatographic profile and quantification of protodioscin in commercial samples and plant extract were evaluated by LC-MS/MS. The percentage of total saponins were determined by the colorimetric method. Extracts and protodioscin cytotoxicity were analyzed by the MTT assay in three cell lineages: fibroblasts (L929), ovarian cancer (Ovcar3) and murine hepatoma (Hepa1c1c7). All extracts displayed high levels of total saponins (207.2 to 780.3 mg g-1 of dry extract). The chromatographic profile revealed a wide diversity of compounds, and the saponin protodioscin was detected in only two extracts. One extract displayed high cytotoxicity, with IC50 values of 157.0, 38.2 and 7.4 µg mL-1 for the Ovcar3, Hepa1c1c7 and L929 cell lines, respectively. The other extracts displayed cytotoxic effects only at concentrations equal to or greater than 125.0 µg mL-1. Surprisingly, the most cytotoxic extract displayed the highest protodioscin concentration. Therefore, it is suggested that these products be marketed with caution, and followed-up by a certified healthcare professional.

Brown seaweed Padina gymnospora is a prominent natural wound-care product

ABSTRACT Seaweeds are related to anti-inflammatory, anti-bacterial and anti-noceptive effects. This work aimed to verify the potential of seaweed Padina gymnospora (Kützing) Sonder 1871 to improve wound healing in vitro. P. gymnospora was collected at a bethonic area in Espirito Santo. Methanolic extract of P. gymnospora was obtained by percolation. To determine cytotoxicity, colorimetric MTT tests were performed against normal fibroblasts (L929), macrophages (RAW 264.7) and human ovarian carcinoma (OVCAR-3) cell lines using concentration range of 12–110 µg ml-1. To evaluate in vitro wound healing, monolayer of fibroblasts L929 was seeded and artificial wounded. Cell proliferation was blocked by 5 µg ml-1 Mytomycin C. Nitric oxide inhibition was quantified with Raw 264.7 by Griess reaction. Minimal inhibitory concentration (MIC) against Staphylococcus aureus was determined. Eletrospray ionization with Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry (ESI-FT-ICR MS) was applied to detail composition of P. gymnospora methanolic extract. No cytotoxic effect in all cell lines was detected until the maximum concentration of 110 µg ml-1. P. gymnospora promoted significantly migration at the concentration of 25 µg ml-1 (p < 0.05). A prominent inhibition of nitric oxide formation was achieved in a concentration of 20 µg ml-1 of methanolic extract of P. gymnospora (62.06 ± 1.20%). Antibacterial activity against S. aureus could be demonstrated with MIC of 500 µg ml-1. ESI-FT-ICR MS analysis indicated eleven molecules between then, linolenic, oleic and linoleic acid. P. gymnospora favored wound repair in vitro what could be related to its fatty acid composition. In addition, its antimicrobial effect, and NO inhibition activity contribute for a new approach of P. gymnospora as a promise natural product for treatment of cutaneous wound.

Level of satisfaction of clients of public pharmacies dispensing high-cost drugs in Espírito Santo, Brazil

ABSTRACT The aim of this study was to evaluate the level of satisfaction of pharmaceutical services and to determine the socioeconomic profile of public pharmacy clients. This is a cross-sectional observational study using a quantitative approach. The sample was calculated from the monthly number of patients seen in pharmacies and was stratified for each pharmacy. Data were analysed using SPSS 11.5 software and by observing the simple relative frequencies for qualitative variables. For the quantitative variables, the analysis of variance (ANOVA) and post-hoc Fisher tests were performed. Data are expressed as mean ± standard deviation (SD). The results show that, in general, patients at "Farmácias cidadãs" are satisfied with the services. However, when stratified, we found that the greatest satisfaction was related only to structural and organizational aspects, while the pharmaceutical services are unsatisfactory. When relating satisfaction to the socioeconomic characteristics, a difference between waiting time (39.07 ± 19.53), attendance by pharmacist (8.91 ± 5.14) and education was observed. It is concluded that users are satisfied with the services of state "Farmácias cidadãs" of Espírito Santo, but there should be improvements in relation to pharmaceutical services and the interpersonal relationships between health professionals and users of the public health system in Brazil.

RESUMO O objetivo do presente estudo foi avaliar o nível de satisfação dos serviços farmacêuticos e a determinação do perfil socioeconômico de clientes de farmácias públicas. Trata-se de um estudo observacional transversal com abordagem quantitativa. A amostra foi calculada através de dados da quantidade mensal de pacientes atendidos nas farmácias e estratificada para cada unidade do Estado. Os dados foram analisados por meio programa SPSS 11.5, observando-se as frequências relativas simples para as variáveis qualitativas. Para as variáveis quantitativas efetuaram-se análise de variância de uma via (ANOVA) e teste post-hoc de Fisher. Os dados foram expressos como a média ± desvio padrão (DP). Os resultados revelam que, em geral, os usuários atendidos nas farmácias cidadãs estão satisfeitos com os serviços, porém, quando estratificado por pergunta, avaliou-se que a maior satisfação está relacionada apenas aos aspectos estruturais e organizacionais e que o serviço farmacêutico é insatisfatório. Quando relacionada à satisfação com as características socioeconômicas, observou-se diferença entre tempo de espera (39.07 ± 19.53), de atendimento pelo farmacêutico (8.91 ± 5.14) e escolaridade. Conclui-se que os usuários estão satisfeitos com os serviços das farmácias cidadãs estaduais do Espírito Santo, porém deve haver melhora em relação ao atendimento farmacêutico e à relação interpessoal entre profissionais de saúde e usuários do sistema público de saúde brasileiro.

Evaluation of the changes on hemostatic parameters induced by valdecoxib in male Wistar rats / Avaliação dos efeitos do valdecoxibe sobre os parâmetros hemostáticos de ratos Wistar

The effects of the cyclooxygenase (COX)-2 selective inhibitor, valdecoxib, on blood coagulation parameters were evaluated, along with aspirin in male Wistar rats. Groups of animals were administered a daily oral dose of 10 mg/kg rat of valdecoxib, 100 mg/kg rat of aspirin and the vehicle alone during 4 weeks. Blood samples were collected at the end of 1, 2, 3 and 4 weeks of administration period and the plasma concentrations of valdecoxib were determined by RP-HPLC giving mean values of 101.1, 113.5, 164.0 and 184.6 ng/mL, respectively. The same plasma samples were used for the analysis of hematological parameters and the results compared to the controls. Valdecoxib induced significant activated partial thromboplastin time reduction (18 percent) after 2 weeks and prothrombin time reduction (12.2 percent) after 3 weeks (P<0.05). There were no significant changes in the platelet count and fibrinogen levels. The anti-factor Xa and anti-factor IIa activities showed slight reductions, but only significant for the anti-factor Xa on the 3rd week (6.7 percent). The results showed that valdecoxib at the dose tested with the plasmatic concentrations induced some changes in the hemostatic function of rats, which can be helpful to understand the side effects and the safe use of the drug.

Avaliaram-se os efeitos do valdecoxibe, um inibidor seletivo da cicloxigenase-2 (COX-2), sobre os parâ­metros sangüíneos da coagulação em ratos Wistar utilizando-se paralelamente a aspirina. Os animais foram divididos em grupos e submetidos à administração oral diária de 10 mg/kg animal para o valdecoxib, 100 mg/kg animal para a aspirina e veículo para o grupo controle, durante quatro semanas. A coleta do sangue foi efetuada após uma, duas, três e quatro semanas, e as concentrações plasmáticas do valdecoxibe determinadas por cromatografia líquida, obtendo-se valores médios de 101,1 - 113,5 - 164 e 184,6 ng/ml, respectivamente. As amostras de plasma foram também usadas para as análises hematológicas e os resultados comparados aos dos controles. O valde­coxibe apresentou redução significativa no TTPA (18 por cento) após duas semanas, e redução do TP (12,2 por cento) após três semanas (P<0.05). Os efeitos observados na contagem de pla­quetas e nos níveis plasmáticos de fibrinogênio não foram significativos. As atividades anti-fator Xa e anti-fator IIa apresentaram redução, porém os resultados foram significativos somente para o anti-fator Xa na terceira semana (6,7 por cento). Os resultados experimentais com as concentrações plasmáticas alcan­çadas demonstram que o valdecoxibe pode induzir alterações nos parâ­metros hematológicos dos ratos. Esses dados poderão contribuir para a melhor compreensão dos efeitos colaterais e uso do fármaco com segurança.

Biological potency evaluation and characterization of rhG-CSF in pharmaceutical products / Avaliação biológica da potência e caracterização de rhG-CSF em produtos farmacêuticos

Realizou-se a identificação do fator estimulador da colônia de granulócitos humanos recombinante em produtos farmacêuticos por eletroforese em gel de poliacrilamida não redutora e imunodetecção com anticorpos específicos, que apresentaram banda única na região de, aproximadamente, 19 kDa. A avaliação de potência baseada na contagem do número de neutrófilos em camundongos com neutropenia forneceu valores entre 88,4 ù 122,4 % em relação à potência declarada. A precisão expressa pela ponderação, calculada nos ensaios independentes, forneceu valores entre 141 e 432. As amostras lote-a-lote cumpriram os requisitos dos testes de toxicidade e endotoxinas bacterianas. Os resultados dos ensaios biológicos e imunológicos demonstram a qualidade dos produtos farmacêuticos em uso clínico, e as especificações sugeridas contribuem para assegurar a inocuidade e eficácia terapêutica dos produtos biológicos.

Avaliação comparativa da atividade biológica de heparinas não-fracionadas em produtos farmacêuticos / Comparison of the biological activities of unfractionated heparins in pharmaceutical products

Realizou-se a avaliação biológica de potência de heparinas convencionais contra o 5º Padrão Internacional de heparina suína pelos ensaios preconizados da inibição da coagulação do plasma ovino (ICPO), tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA) e anti-fator Xa. Correlacionaram-se os resultados, demonstrando que o ICPO fornece potências em média 10,72 por cento, significativamente superiores aos outros procedimentos. Analisou-se a influência de diferentes lotes de plasma sobre o resultado do ensaio do ICPO observando-se variação de até 7,32 por cento. Como alternativa, padronizou-se o ensaio do anti-fator IIa e efetuou-se a determinação de potência das amostras obtendo-se valores reprodutíveis, comparáveis ao método do anti-fator Xa, que demonstram a viabilidade da inclusão como ensaio harmonizado para o controle da qualidade. Os resultados de potência, fornecidos lote a lote, em geral, cumprem as especificações farmacopéicas e demonstram a qualidade que garante a segurança e eficácia clínica dos medicamentos

Avaliaçäo da atividade e caracterizaçäo de eritropoietina humana recombinante em produtos farmacêuticos / Activity evaluation and characterization of recombinant human erythropoietin in pharmaceutical products

Realizou-se a identificaçäo de eritropoietina humana recombinante em produtos farmacêuticos comerciais por eletroforese em gel de poliacrilamida e detecçäo com anticorpos específicos, demonstrando-se típica banda larga, semelhante ao padräo de rhEPO da Farmacopéia Européia. Igualmente por focalizaçäo isoelétrica e imunodetecçäo, observaram-se 5-6 isoformas características de acordo com o laboratório produtor. A avaliaçäo de potência efetuada através de ensaio biológico em camundongos normocitêmicos forneceu valores entre 67,6 por cento e 119,4 por cento em relaçäo à declarada. A precisäo dos ensaios combinados, calculada pela ponderaçäo, variou de 200 a 389. Os testes de endotoxinas bacterianas, toxicidade e pH apresentaram valores variáveis conforme o lote. Concluiu-se destacando a importância dos testes e ensaios de controle para assegurar a qualidade lote a lote e garantir a eficácia terapêutica dos produtos farmacêuticos